1. Métodos de estudio y la célula

1.1 Del tejido a la laminilla

Fuente principal: Pawlina, 9.ª ed. (2024); Mescher, 17.ª ed. (2024).

Objetivos

• Describir los pasos para preparar un corte histológico y explicar qué artefactos produce cada uno.
• Predecir qué estructuras se tiñen con hematoxilina, con eosina y con las tinciones especiales más usadas.
• Reconocer los organelos de la célula y relacionar su abundancia con la función del tejido.

Conceptos clave

La histología estudia los tejidos: grupos de células con su matriz extracelular que cumplen una función común. Sólo existen cuatro tejidos básicos (epitelial, conjuntivo, muscular y nervioso), y todos los órganos son combinaciones de ellos. Por eso el primer paso frente a una laminilla nunca es adivinar el órgano, sino identificar los tejidos que la forman.

Para estudiar un tejido al microscopio óptico se sigue una secuencia: fijación (formol al 10 % amortiguado, que entrecruza las proteínas y detiene la autólisis), deshidratación en alcoholes crecientes, aclaramiento en xileno, inclusión en parafina, corte con micrótomo a 4-6 µm y tinción. Cada paso deja huella: la deshidratación disuelve los lípidos, por eso los adipocitos se ven «vacíos»; la retracción del tejido produce espacios artificiales alrededor de células y glándulas.

1.2 Tinciones: qué se pinta y por qué

Fuente principal: Mescher, 17.ª ed. (2024).

La tinción de rutina es hematoxilina y eosina (H-E). La hematoxilina se comporta como colorante básico y tiñe de azul-morado las estructuras basófilas, ricas en ácidos: el núcleo (ADN), el retículo endoplásmico rugoso y los ribosomas (ARN), y la matriz del cartílago (glucosaminoglucanos sulfatados). La eosina es ácida y tiñe de rosa las estructuras acidófilas o eosinófilas: casi todo el citoplasma, las mitocondrias, la colágena y los glóbulos rojos.

La inmunohistoquímica usa un anticuerpo unido a una enzima o a un fluorocromo para localizar una proteína concreta: citoqueratinas en los epitelios, vimentina en el mesénquima, desmina en el músculo, receptores hormonales en el cáncer de mama. Es la herramienta que decide el origen de un tumor poco diferenciado.

El microscopio óptico resuelve hasta unos 0.2 µm: distingue núcleos, células y fibras, pero no membranas ni ribosomas. El electrónico de transmisión resuelve menos de 1 nm y muestra organelos y uniones; el de barrido muestra superficies en relieve. Como referencia, un eritrocito mide unos 7.5 µm y sirve como «regla» en cualquier corte.

1.3 La célula y sus organelos

Fuente principal: Pawlina, 9.ª ed. (2024).

La membrana plasmática es una bicapa lipídica con proteínas y un glucocáliz en su cara externa. Dentro, el núcleo guarda la cromatina: la eucromatina es laxa y activa (núcleo pálido, «vesicular»), la heterocromatina es densa e inactiva (núcleo oscuro). Un nucléolo grande indica síntesis intensa de ribosomas.

Cada organelo tiene una «firma» en el corte. El retículo endoplásmico rugoso, con ribosomas, sintetiza proteínas de exportación y da basofilia al citoplasma (célula plasmática, acino pancreático). El liso sintetiza lípidos y esteroides y destoxifica fármacos (corteza suprarrenal, hepatocito). El aparato de Golgi modifica y empaca; en la célula plasmática se ve como un halo claro junto al núcleo. Las mitocondrias producen ATP y dan acidofilia intensa (túbulo proximal, célula parietal). Los lisosomas degradan; los peroxisomas oxidan ácidos grasos de cadena muy larga.

El citoesqueleto tiene tres sistemas: los microfilamentos de actina (7 nm), los filamentos intermedios (10 nm) y los microtúbulos (25 nm). Los intermedios son específicos de cada linaje y por eso se usan como marcadores: citoqueratinas (epitelio), vimentina (mesénquima), desmina (músculo), proteína ácida fibrilar glial (astrocitos) y neurofilamentos (neuronas).

1.4 Ciclo celular y muerte celular

Fuente principal: Pawlina, 9.ª ed. (2024); Mescher, 17.ª ed. (2024).

El ciclo celular tiene una interfase (G1, S y G2) y una mitosis (profase, metafase, anafase y telofase). Los puntos de control G1/S y G2/M, vigilados por p53 y por las ciclinas con sus cinasas, impiden que una célula con ADN dañado se divida. Según su capacidad de dividirse, los tejidos son lábiles (epitelios de piel e intestino, médula ósea), estables (hepatocito, túbulo renal) o permanentes (neurona, miocito cardíaco).

La apoptosis es muerte programada: la célula se encoge, la cromatina se condensa (picnosis) y se fragmenta en cuerpos apoptósicos que se fagocitan sin inflamación. La necrosis, en cambio, hincha la célula, rompe la membrana y provoca inflamación; es la que se ve en un infarto.

Correlación clínica: la capacidad de regeneración explica la evolución de las lesiones. Un hígado puede recuperarse tras perder parte de su masa; el miocardio infartado no regenera y se repara con una cicatriz de colágena; la neurona perdida no se reemplaza.

1.5 Repaso del capítulo

Errores frecuentes

• Llamar «vacuolas» a los espacios de los adipocitos: son lípidos que se disolvieron durante la deshidratación.
• Pensar que «basófilo» es un tipo de célula siempre: aquí describe una afinidad de tinción, no al granulocito.
• Confundir apoptosis con necrosis: la apoptosis no produce inflamación.

Perlas

Repaso del capítulo: 20 preguntas

Elija una sola respuesta en cada pregunta. La clave y su explicación están al final del capítulo.

1. ¿Cuántos tejidos básicos forman todos los órganos del cuerpo?

A) Tres tejidos

B) Seis tejidos

C) Quince tejidos

D) Cuatro tejidos

2. Una biopsia de piel llega al laboratorio en solución salina y las células ya se autolisaron. ¿Qué paso omitido lo habría evitado?

A) La fijación con formol

B) El aclaramiento con xileno

C) La inclusión en parafina

D) El corte con el micrótomo

3. ¿Cuál es el orden correcto de la técnica de rutina?

A) Deshidratación, fijación, inclusión, aclaramiento

B) Fijación, inclusión, deshidratación, aclaramiento

C) Fijación, deshidratación, aclaramiento, inclusión

D) Aclaramiento, fijación, deshidratación, inclusión

4. En una biopsia de glándula se ven espacios claros alrededor de los acinos que no tienen revestimiento. ¿Qué son con más probabilidad?

A) Vasos linfáticos dilatados por un edema intenso

B) Retracción del tejido durante el procesamiento

C) Conductos excretores que perdieron su epitelio

D) Depósitos de lípido que se disolvieron

5. ¿Qué grosor tiene un corte de rutina en parafina?

A) De 4 a 6 µm

B) De 40 a 60 µm

C) De 0.4 a 0.6 µm

D) De 1 a 2 mm

6. En la biopsia de rodilla de un paciente con artrosis, ¿qué estructura se tiñe de azul con la hematoxilina por sus glucosaminoglucanos sulfatados?

A) La colágena de la dermis

B) El citoplasma del hepatocito

C) Las mitocondrias del túbulo

D) La matriz del cartílago

7. Un eritrocito en un corte con H-E se ve rosa intenso. ¿Cómo se describe esa afinidad?

A) Acidófila o eosinófila

B) Basófila o hematoxilínica

C) Metacromática con azul

D) Argirófila con plata

8. Una biopsia hepática se envía para medir cuánta fibrosis hay. ¿Qué tinción la muestra mejor?

A) Rojo Congo con luz polarizada

B) Ziehl-Neelsen para micobacterias

C) Orceína para fibras elásticas

D) Tricrómica de Masson (colágena)

9. En un ganglio linfático se quiere ver el armazón de fibras reticulares. ¿Qué técnica se usa?

A) Tinción de PAS con diastasa

B) Impregnación argéntica

C) Tinción de Gram modificada

D) Hematoxilina férrica sola

10. Una biopsia de pulmón de un paciente con tos crónica y fiebre vespertina se tiñe con Ziehl-Neelsen. ¿Qué se busca?

A) Hongos con pared de glucógeno

B) Bacilos ácido-alcohol resistentes

C) Fibras de amiloide depositadas

D) Cristales de urato en agujas

11. Un hombre de 60 años tiene un tumor de partes blandas poco diferenciado. ¿Qué marcador de inmunohistoquímica indica que es muscular?

A) Desmina

B) Queratina

C) Vimentina

D) Melan-A

12. ¿Cuál es el límite de resolución aproximado del microscopio óptico?

A) 0.2 nm

B) 2.0 µm

C) 0.2 mm

D) 0.2 µm

13. Para estudiar la superficie en relieve de los cilios de la tráquea, ¿qué microscopio conviene?

A) Electrónico de barrido

B) Electrónico de transmisión

C) Óptico de campo claro

D) Óptico con luz polarizada

14. Un núcleo pálido, «vesicular», con nucléolo grande, ¿qué sugiere?

A) Célula en reposo o senescente

B) Célula con síntesis activa

C) Célula muerta por necrosis

D) Célula en apoptosis temprana

15. ¿Qué organelo produce la acidofilia intensa del túbulo proximal y de la célula parietal?

A) El retículo endoplásmico liso

B) Los lisosomas primarios

C) Las mitocondrias abundantes

D) Los ribosomas libres

16. En la médula ósea de un paciente con mieloma abundan células con un halo claro junto al núcleo. ¿A qué corresponde el halo?

A) Al retículo liso

B) A un lisosoma grande

C) A una gota de lípido

D) Al aparato de Golgi

17. ¿Qué organelo oxida los ácidos grasos de cadena muy larga?

A) El lisosoma

B) El proteasoma

C) El peroxisoma

D) El endosoma

18. ¿Qué filamento del citoesqueleto mide unos 25 nm?

A) El microfilamento

B) El microtúbulo

C) El tonofilamento

D) El neurofilamento

19. ¿Cuál de estos tejidos está formado por células lábiles?

A) El miocardio adulto sano

B) La neurona cortical

C) El epitelio intestinal

D) El hepatocito adulto

20. Un hombre pierde 60 % del hígado en una cirugía y meses después la masa hepática se ha recuperado. ¿Qué lo explica?

A) El hepatocito es una célula permanente

B) El hígado se repara sólo con cicatriz

C) El hepatocito es una célula estable

D) Las células de Kupffer se vuelven hepatocitos

Clave del repaso

1. D. Epitelial, conjuntivo, muscular y nervioso; todo órgano es una combinación de ellos.

2. A. El formol al 10 % amortiguado fija el tejido; los pasos siguientes deshidratan, aclaran, incluyen y cortan.

3. C. «Fíjate, Deshidrátate, Aclárate, Incluye, Corta y Tiñe».

4. B. La deshidratación retrae el tejido y deja espacios artificiales alrededor de células y glándulas.

5. A. El micrótomo corta a 4-6 µm, suficiente para ver una capa de células.

6. D. La hematoxilina se comporta como colorante básico y tiñe lo ácido: núcleo, ARN y matriz cartilaginosa.

7. A. La eosina, colorante ácido, tiñe la hemoglobina y casi todo el citoplasma.

8. D. La tricrómica tiñe la colágena de azul o verde y permite graduar la fibrosis.

9. B. Las fibras reticulares (colágena III) se ven negras con plata.

10. B. El Ziehl-Neelsen identifica micobacterias como la de la tuberculosis.

11. A. Los filamentos intermedios son propios de cada linaje: desmina en el músculo.

12. D. Resuelve núcleos, células y fibras, pero no membranas ni ribosomas, que requieren el electrónico.

13. A. El de barrido muestra superficies en tres dimensiones; el de transmisión, el interior de la célula.

14. B. La eucromatina laxa es activa y el nucléolo grande fabrica ribosomas.

15. C. Las mitocondrias son eosinófilas; abundan donde hay transporte activo intenso.

16. D. El Golgi no se tiñe y deja un halo junto al núcleo de la célula plasmática.

17. C. Los peroxisomas oxidan ácidos grasos de cadena muy larga; los lisosomas degradan material.

18. B. Actina 7 nm, intermedios 10 nm y microtúbulos 25 nm.

19. C. Los lábiles se dividen siempre (piel, intestino, médula); el hepatocito es estable y la neurona permanente.

20. C. Las células estables vuelven a dividirse cuando hay pérdida de tejido.

Referencias

• Pawlina W. Histology: A Text and Atlas with Correlated Cell and Molecular Biology. 9th ed. Wolters Kluwer; 2024.
• Mescher AL. Junqueira's Basic Histology: Text and Atlas. 17th ed. McGraw Hill; 2024.